Live Science: Laboratorio

Laboratorio de diagnóstico clínico

RECUENTO DE LEUCOCITOS

FUNDAMENTO
El recuento de leucocitos consiste en la determinación del número de leucocitos presentes en un volumen determinado de sangre.
Para realizar este recuento utilizaremos la cámara de recuento Neubauer mejorado, donde depositaremos la muestra de sangre diluida en cierta cantidad de líquido Turck (azul).

MATERIAL

1 Microscopio
1 Cámara de recuento Neubauer
1 Cubre de cámara
1 Pipeta de 0,5 ml
1 aspirador azul (5)
1 micropipeta de 20 micras
3 puntas de micropipeta
1 Papel parafilm
1 Papel de filtro
1 Gradilla
1 par de guantes

REACTIVOS
Líquido de disolución Turck, se compone:

2 ml de ácido acético glacial
1 ml de solución acuosa de violeta de genciana al 1%
100 ml de agua destilada

MUESTRA

Sangre anticoaguada EDTA

PROCEDIMIENTO

Colocamos todos los materiales, reactivos y muestra en el banco de trabajo.
Con la pipeta de 0,5 ml y aspirador azul pipeteamos 0,4 ml de líquido Turck.
Vertemos los 0,4 ml en el tubo de ensayo.
Las cantidades que precisamos son: 0,38 ml de líquido Turck y 20 ul de sangre EDTA
Utilizaremos la micropipeta con punta correspondiene para obtener 20 ul del tubo de 0,4 ml, quedandono los 0,38ml de líquido Turck que buscamos.
Con otra micropunta limpia/desechable tomamos 20 ul de sangre EDTA que vertemos en el tubo de ensayo que tenemos 0,38 ml.
Colocamos papel parafilm en la boca del tubo, homogeneizamos y depositamos en la gradillla.
El proceso de carga de la cámara es identico al de Hematies, que ya describimos con anterioridad más abajo.
El cáculo tras el recuento:

WBC = L/4 x 10 x D

D = 20 Factor de disolución
L = Total Leucocitos en los 4 cuadrados grandes

Para el recuento de leucocitos utilizaremos el microscopio con objetivo de 10X

Laboratorio de diagnóstico clínico
RECUENTO DE HEMATÍES

FUNDAMENTO

El recuento de hematíes (RBC) consiste en la determinación del número de estos presentes en un volumen determinado de sangre.

Para llevar a cabo dicho procedimiento utilizaremos la cámara de recuento Neubauer mejorado, donde depositaremos la muestra de sangre diluida en cierta cantidad de líquido Hayem.

MATERIAL

1 Microscopio
1 Cámara de recuento Neubauer
1 Cubre de cámara
1 Pipeta de 5ml
1 aspirador (verde)
1 micropipeta de 20 u
3 Puntas de micropipeta
1 Papel parafilm
1 papel de filtro
1 Gradilla
1 par de guantes

REACTIVOS

Líquido de disolución Hayem, que se compone de:

2,5 g de sulfato sódico
0,5 g de cloruro sódico
0,25g de cloruro mercúrico
100 ml de agua destilada

MUESTRA

Sangre anticoagulada EDTA

PROCEDIMIENTO

Colocamos todos los materiales, reactivos y muestra en el banco de trabajo.
Con la pipeta de 5ml, pipeteamos 4ml de un tubo de ensayo que contenga líquido de Hayem, que será nuestro líquido de dissolución para esta práctica.
Vertemos los 4 ml del líquido Hayem en un tubo de ensayo limpio.
Las cantidades de líquido de Hayem y de sangre EDTA son: 3,98 ml de líquido de disolución Hayem y 20 ul de sangre EDTA.

Para obtener los 3,98 ml Hayem utilizamos la pipeta de 20 u y una punta de pipeta.
Al tubo de 4ml Hayem extaremos 20 ul y ya tenemos los 3,98 ml.

Homogeneizamos la muestar de sangre EDTA.
Utilizamos otra punta de micropipeta (no usar la anterior). Las colocaremos ordenadamente sobre le banco de trabajo. Tomamos 20 ul de sangre EDTA y la vertems sobre el tubo de ensayo de 3,98 ml Hayem.
Colocamos paple parafilm en la boca del tubo y la dejamos en la gradilla.

Procedemos a cargar la cámara de recuento.

Del tubo que ya tenemos preparado, con otra micropunta tomamos la cantidad de 20 ul. Previamente habreos colocado el cubre de cámara de recuento. para su correcta colocación, humedecemos las "bandas transversales" de la cámara de recuento, con agua destilada ayudandonos de un dedo, por ejemplo. Después colocaremos encima el cubre.
Homogeneizamos el tubo. Tomamos 20 ul con la micropipeta y pasamos a cargar la cámara de Neubauer (2 retículos).

Colocamos la cámara en la platina del microscopio.
Utilizaremos para le recuento de hematíes el objetivo de 40x y con el condensador a baja altura.

Contamos los hematíes distribuidos en los siguientes cuadrados:

Cuadrado central>cuadrados esquinas 4 y en central

Orden correcto para contrar y evitar errores es el suiguiente: Contamos los hematíes contenidos en los cuatro cuadrados superiores. Una vez que hemos llegado al último seguimos contando en el cuadrado inferior a este último y ahora contamos en sentido contrario. Cuando hemos contado los siguientes 4 cuadrados bajamos al inferior de este último y asi sucesivamente hasta contar un total de 16 cuadrados.

Recordemos que estamos en el cuadrado central del retículo. Y los cuadrados a contar son los 4 de las esquinas y el central. (16 x 5).

Sólo contaremos los que están contenidos dentro del cuadrado y los que se encuentran en contacto con sus líneas de demarcación superior y derecha.
Tras el recuento procedemos al cálculo utilizando la fórmula:

RBC = H X 5 X 10 X D

RBC: recuento de hematíes
H: hematíes contados en los 5 cuadrados medianos centrales.
D: factor de disolución = 200

Laboratorio de diagnóstico clínico
Visualización de una cámara de recuento

Fundamento

Observar el retículo de la cámara de recuento, cuentaglóbulos o hemocitómetro de retículo de Neubauer mejorado con el microscopio.

Material

1 microscopio

1 cámara de recuento de retículo Neubauer mejorado

Técnica

1. Observar con el microscopio el retículo de la cámara con objetivos 4x, 10x y 40x.

2. Enfocamos con objetivo 10x uno de los cuadrados grandes situados en las cuatro esquinas del retículo.

3. Utilizando objetivo 10x y 40x interpretaremos con exactitud cada uno de los cuadrados enfocados.

Lectura de los resultados

Teniendo en cuenta la longitud de cada uno de los lados del retículo, calcularemos:

- Longitud de los lados de cada cuadrado grande periférico: obtenemos 1 mm.

- Longitud de los lados de cada uno de los cuadrados medianos en un cuadrado grande periférico: obtenemos 0'25 mm = 1/4 mm.

- La altura entre el retículo y el cubre: obtenemos 0'1 mm.

- Volumen del retículo: 3 X 3 X 0'1 = 0'9 mm3

- Volumen de un cuadrado grande (uno de los 4 cuadrados periféricos):

1 X 1 X 0'1 = 0'1 km2

- Volumen de un cuadrado mediano (incluido en el cuadrado grande periférico):

1/4 X 1/4 X 0'1 = 1/160 mm3 = 0'0625 mm3 = 6'25 . 10-3 mm3.

- cuadrado grande central: 25 cuadrados medianos: B X 25

- cuadrado grande exterior (4): 16 cuadrados medianos: B = 16

- Altura de la cámara de recuento: 0'1 mm (respecto al cubre).

- Longitud del cuadrado grande central: 1mm.

- Longitud de los lados de cada uno de los cuadrados medianos incluidos en el cuadrado grande central: 1/5 mm = 0'2 mm.

- Longitud de los lados de cada uno de los cuadrados pequeños contenidos en uno de esos cuadrados medianos: 1/20 mm = 0'05 mm.

- Volumen cuadrado grande central: 1 X 1 X 0'1 = 0'1 mm3.

- Volumen cuadrado mediano (B): 1/5 X 1/5 X 0'1 = 1/250 = 4.10-3 mm3.

- Volumen cuadrado pequeño (c): 1/20 X 1/20 X 0'1 = 1/4000 = 2'5 .10-4 mm3.

Laboratorio de diagnóstico clínico
Estudio microscópico de la

cristalización de la saliva

En el periodo preovulatorio, debido a la creciente concentración de estribemos en el

organismo de la mujer, comienzan a formarse en su saliva unos cristales en forma de

helecho, que van aumentando en cantead y visibilidad a medida que nos acercamos a la

ovulación.

La cristalización máxima de la saliva se produce cuando la concentración de estribemos

llega a un nivel máximo. Esto sucede justo antes de la ovulación.

Una cristalización considerable de la saliva se prolonga, pero ya en descenso, durante 3 -

4 días que siguen a la ovulación. En el periodo post-ovulatorio, debido a la alta

concentración de progesterona en el plasma, los cristales van desapareciendo, hasta ser

casi inexistentes en la última semana del ciclo menstrual.

Fundamento

La saliva, en presencia de una concentración apreciable de estrógenos, cristaliza cuando

se la deja secar sobre un portaobjetos siendo visible con el microscopio.

Material

1 microscopio

2 portas

1 cubre

1 papel de secado

Muestra

Saliva del paciente. Es aconsejable que el paciente se enjuague la boca para procurar

que la saliva esté limpia.

Técnica

1. Limpiar el porta. Un paño pequeño de algodón es preferible al papel.

2. Depositamos una gota de saliva sobre el porta.

3. Extender la gota. Podemos ayudarnos con un segundo porta.

4. Podemos cubrir con el cubre aunque no es necesario.

5. Si no cubrimos dejamos secar al aire.

6. Colocamos la muestra en la platina del microscopio. Asegurarnos que la cara del porta

esta hacia arriba.

7. Enfocar la preparación. 10x y 40x.

8. Utilizar poca luz. Alejamos el condensador y cerramos parcialmente del diafragma.

Lectura de los resultados

Los cristales que se forman tienen aspecto de hoja de helecho. Puede presentar las

siguientes formas:

- cristalización abundante

- cristalización media

- cristalización nula

Laboratorio de genética

Crean la primera célula artificial que se reproduce con normalidad

Este descubrimmiento científico permitirá crear nueas vacunas y biocombustiles

Esto es el inicio de creación de organismo a nuestro interés. La primera célula cientifica conocida como "Mycoplasma mycoides JCVI-syn 1.0" y gestada en un laboratorio, supone la revolucuón de la vida artificial. esto es el fruto de investigaciones de hace ya unos 15 años de intensos trabajos y de una inversión de unos 32 millones de euros. A la cabeza del proyecto se encuentra el biólogo y empresario estaunidense John Craig Venter, que es el padre del genoma humano, y rodeado de un prestigioso equipo de científicos.

El descubrimiento es un claro éxito, pero algunos ya han apuntado que está lejos de crear vida y que sólo se ha conseguido reemplazar el ADN y por tanto no ha creado una célula sin
tética nueva.

Se persigue con todo esto la creación de organismos que permitan acelerar la fabricación de vacunas. En el cas ode la gripe se podria reducir en un 99% su tiempo de fabricación. Otra camino a perseguir es a diseñar algas que absorban el CO2 o fabricar nuevos hidrocarburos asi como la obtención de nuevas sustancias químicas, ingredientes alimenticios o limpiar el medio ambiente.

Análisis de orina

Células epiteliales

Células escamosas células de transición